La probabilità di ottenere una gravidanza con le tecniche "a fresco" di II e III livello dipende da vari fattori. Scoperta in Italia negli anni ’90, prevede, come nella FIVET, che l’incontro di ovocita e spermatozoo (gameti) avvenga all’esterno del corpo della donna. È utilizzata per risolvere tutti quei casi di grave infertilità maschile in cui, a causa della mancanza di un numero sufficiente di spermatozoi (meno di 1.500.000 per millilitro di liquido seminale) o della loro ridotta capacità di movimento, non può avvenire una fecondazione spontanea.
La fecondazione dell’ovocita avviene con una iniezione diretta di un singolo spermatozoo all’interno del citoplasma (parte della cellula) dell’ovulo. È consigliata alle coppie che esprimono il desiderio di evitare una fecondazione extracorporea. Tale procedura in Italia è lecita solo per le coppie di sesso diverso, sposate o conviventi con infertilità diagnosticata.
Assisted reproduction techniques (ART) include in vitro fertilization (IVF)-related procedures such as conventional IVF, where egg and sperm are combined in a dish and fertilization takes place without injection, intracytoplasmic sperm injection (ICSI), and intracytoplasmic morphologically selected sperm injection (IMSI). The ECLIPSE Ti2-I and ECLIPSE Ti2-U IVF inverted microscope is suited towards ART applications, featuring a stable frame compatible with a range of micromanipulators made by third party manufacturers.The ECLIPSE Ti2-I allows the microscope settings to be automatically controlled via simple buttons and a touch screen close to your hands - it has improved efficiency by reducing the steps required for operation by approximately 75%. An alert function and bright, clear field of view support accurate operation.The Ti2-U IVF also features a laser-safe design compatible with various laser-based system devices designed for ART-related applications. Intermediate magnification can be applied in the microscope body (1.5X and 2.0X available), allowing for detailed imaging with low magnification objectives. For example, 300X total magnification can be achieved using standard 10X eyepieces, 1.5X intermediate magnification, and a 20X objective lens.
Image courtesy of: The Ronald O. Oocytes are thick cells and usually kept in culture vessels with thick plastic bottoms, such as petri dishes. This makes selection of an appropriate objective lens somewhat challenging as users will require both longer working distance and a high NA (for high resolution imaging). Culture vessels are not only thick but have a different refractive index than air. The selected objective lens will ideally provide spherical aberration correction accounting for the vessel. View of an oocyte using Nikon’s spindle observation system. There are many contrasting techniques beyond standard brightfield microscopy, each with their own balance of benefits and restrictions. One of the major challenges is the culture vessel itself, which is generally made of plastic rather than glass. Phase contrast is a widespread and useful technique for thin specimens, such as imaging sperm as part of a motility assay. Spindle observation is a specialized polarized light technique that optically stains the meiotic spindle in oocytes, making it appear in a cyan or red hue.
1. Tomari H, Honjo K, Kunitake K, et al. Meiotic spindle size is a strong indicator of human oocyte quality. Reprod Med Biol. 2018. 17(3): 268-274. Example of a sample warmer for maintaining sample temperature. Oocytes, sperm cells, and blastocysts are sensitive to changes in environmental conditions. Differential Interference Contrast (DIC)DIC provides the greatest resolution and optical sectioning performance of the techniques listed here but is not compatible with plastic vessels. Illumination SourceIllumination sources for transmitted light-based contrast techniques are most often either light emitting diodes (LEDs) or halogen lamps. Oblique IlluminationOblique illumination techniques rely upon illumination at an oblique angle to provide relief-like contrast. Phase ContrastPhase contrast is a contrasting technique often used for imaging thin and relatively transparent samples, such as cell cultures, and compatible with plastic vessels. Spindle ObservationSpindle observation is a polarized light microscopy technique that allows for visualization of the meiotic spindle with color contrast.
Thermal Control AvailabilityTemperature regulation is important for cell health. Creato uno strumento semplice e low cost per selezionare gli spermatozoi migliori da usare nella fecondazione assistita: si tratta di un semplice dispositivo realizzato in silicio e vetro che sfrutta il comportamento naturale degli spermatozoi per separare senza danneggiarli quelli sani dalle cellule inattive. L'idea, di Ali Heydari dell'Università Tarbiat Modares di Teheran, in Iran, è stata riportata sulla rivista Scientific Reports. Isolare gli spermatozoi più attivi da un campione per utilizzarli per l inseminazione è importante per la FIV, ma gli attuali metodi di separazione clinica che utilizzano le centrifughe possono danneggiare le delicate cellule.
Infatti il tasso di successo di queste tecniche di riproduzione assistita è generalmente compreso tra il 30 e il 40 per cento per ciclo di trattamento.Gli esperti hanno sviluppato un metodo che sfrutta le caratteristiche naturali degli spermatozoi: quando non c'è un flusso di liquido, gli spermatozoi tendono a muoversi in modo circolare, ma quando c'è una corrente, nuotano in una direzione precisa. Heydari ha quindi progettato un dispositivo fatto di silicio incollato su vetro in cui un campione di sperma viene iniettato con una siringa, creando una direzione di flusso. Il circuito è dotato di quattro canali, ciascuno di soli 90 micrometri (?m) di diametro, contenenti ostacoli. Questi ostacoli fanno sì che gli spermatozoi attivi si riorientino nuotando verso i serbatoi vicini, dove possono essere aspirati, mentre le cellule morte e i detriti non riescono a raggiungere i serbatoi e vengono lavati via e attraversano il dispositivo.Gli esperti hanno anche scoperto che era possibile isolare solo gli spermatozoi più veloci aumentando la velocità del flusso. Quello sviluppato è un metodo molto delicato e naturale e semplice da usare.
Per realizzare questo trattamento, è necessario effettuare una stimolazione ovarica controllata, per ottenere ovuli che verranno successivamente fecondati in laboratorio. Quando ricorrere alla fecondazione in vitro? Probabilità di successo della Fecondazione in VitroAl primo tentativo hai un 64,6% di possibilità di successo (utilizzando tutti gli embrioni ottenuti da questo ciclo, ma in vari trasferimenti), arrivando a un 91,7% al terzo tentativo. L'età è una variabile molto importante che influisce sui tassi di successo dei trattamenti. In IVI questi tassi sono molto elevati, perché personalizziamo la stimolazione ormonale adattandoci alle necessità di ogni paziente. Con la prima visita in clinica, i nostri specialisti eseguiranno una valutazione della paziente e, se presenti, analizzeranno i dossier medici dei trattamenti precedenti. Verrà dunque realizzata una valutazione ginecologica completa e uno studio del seme maschile, se necessario. Con l'inizio del trattamento, inizia la stimolazione ovarica, che dura circa 10-14 giorni e prevede la somministrazione di iniezioni giornaliere, che la paziente può effettuare in maniera autonoma. Lo specialista effettua un follow-up della stimolazione, controllando l'andamento della risposta mediante varie ecografie e analisi del sangue. Si tratta di una procedura semplice che non dura più di 15-20 minuti e si realizza in un ambiente sterile ad hoc e sotto sedazione, per evitare qualsiasi possibile disturbo alla paziente. La coltura degli embrioni dura da 5 a 6 giorni. Per effettuare il transfer, è necessario preparare precedentemente l’utero della paziente, assicurandosi che l’endometrio (lo strato interno dell’utero) abbia lo spessore ottimale per accogliere l'embrione e facilitare la gravidanza. Successivamente, il miglior embrione viene trasferito nell’utero per via vaginale con l’aiuto di una cannula. I nostri specialisti comunicheranno la data ottimale per effettuare il test di gravidanza tramite una specifica analisi del sangue, da effettuare generalmente 11 giorni dopo il transfer. La FIV ha tassi di gravidanza migliori rispetto all’inseminazione artificiale. Il costo approssimativo del trattamentto di fecondazione in vitro presso IVI varia a seconda delle esigenze specifiche di ogni paziente. All’IVI le percentuali di successo sono molto buone perché personalizziamo la stimolazione ormonale, adattandola alle esigenze di ogni paziente. Un ciclo di FIVET non è doloroso. Il prelievo degli ovociti (pick-up) viene eseguita in sala operatoria e sotto sedazione. Sebbene l’intervento in sé non sia doloroso, nei primi giorni dopo il prelievo la paziente può avvertire fastidio, disturbi addominali e un leggero gonfiore. Normalmente l’impianto embrionale avviene entro sei-otto giorni dall’ovulazione e dalla fecondazione dell’ovocita, che coincide con l’evoluzione dell’embrione allo stadio di blastocisti. La stimolazione ovarica controllata è il primo step del trattamento di fecondazione in vitro, il cui obiettivo è ottenere la maturazione simultanea di più follicoli nell’ovaio; in questo modo si riesce ad aumentare il numero di ovociti disponibili per la fecondazione e, di conseguenza, ad aumentare le possibilità di ottenere una gravidanza. Nei primi giorni di trattamento, i sintomi sono praticamente inesistenti; cominciano a comparire quando le ovaie aumentano di dimensioni per effetto dei farmaci somministrati. La fase della stimolazione ovarica dipende da molti fattori, soprattutto in relazione alla risposta dell’ovaio ai farmaci somministrati e alla crescita follicolare adeguata. Consiste nell’aspirare con un ago il liquido follicolare dalle ovaie attraverso la cavità vaginale sotto guida ecografica.
Sono arrivata ad IVI che ero spaventata, avevo timore di rivivere sensazioni e situazioni già vissute, e di essere considerata come una delle tante, ma per fortuna in questo caso non è stato così. L'approccio che hanno in clinica è professionale ma soprattutto umano.Appena arrivata mi sono sentita accolta, capita, coccolata, rispettata da tutta l'equipe, nessuno escluso, ma in particolare dal medico che mi ha seguita il Dottor Mauro Cozzolino, che mi ha letteralmente tenuta per mano durante l 'intero percorso. Con professionalità, dedizione ed estrema delicatezza mi ha guidata, supportata e rassicurata, rispondendo ad ogni mia domanda, accompagnandomi passo dopo passo nella realizzazione di questo mio grande sogno, che grazie a lui e grazie a tutta la squadra IVI sono riuscita a realizzare. Oggi aspetto il mio piccolo grande miracolo e non potrei essere più grata al dottor Cozzolino e a tutta la squadra per il lavoro incredibile che fanno ogni giorno, e per il modo in cui lo fanno! Consiglio di concedersi a tutte quelle coppie che come noi avevano perso la speranza, un'ultima possibilità qui da IVI.
Uno dei nostri maggiori contributi nel campo della procreazione medicalmente assistita è stato lo sviluppo del Metodo Cryotop®, che ha reso popolare la rivoluzionaria tecnica di vitrificazione di ovociti ed embrioni, garantendone l’implementazione a livello globale. sparMED è un’azienda danese che produce una gamma di dispositivi medici per i laboratori di fecondazione in vitro, tra i quali disinfettanti, plasticheria e cryoware. L’attività di fecondazione in vitro è molto delicata e sensibile, e richiede solo i prodotti più sicuri, innocui per ovociti, embrioni e spermatozoi. Oosafe® è il marchio registrato per l’uso nei laboratori di fecondazione in vitro. Come indicato nel claim “GOosafe in IVF Laboratories”, tutti i prodotti Oosafe® sono sicuri e soddisfano completamente i requisiti dei laboratori di fecondazione in vitro.Halotech DNA, con sede a Madrid e fondata nel 2008, è un’azienda leader nel campo delle biotecnologie dedicata alla ricerca, sviluppo e commercializzazione di soluzioni nel campo della fertilità. Kit diagnostici in vitro, come Halosperm G2 PRO® ed Oxisperm®, sono alcune delle soluzioni innovative e di alta qualità che Halotech DNA propone.Con oltre 25 anni di esperienza, Reproline Medical GmbH offre prodotti medicali di altissima qualità per la medicina riproduttiva come i puntali Soft Denudation Tips.Fornitori specializzati in strumentazioni e materiali di consumo per laboratori di fecondazione in vitro. Hunter Scientific vanta oltre 26 anni di esperienza nella fornitura di centri di fecondazione in vitro sia nel Regno Unito che all’estero. Produttori di pipette Pasteur, dispositivi medici di Classe IIa, per procedure di fecondazione in vitro.Cryo Bio System è un’azienda francese specializzata dal 1987 nella progettazione, produzione e commercializzazione di soluzioni per la crioconservazione a temperature ultra-basse. Parte del gruppo IMV Technologies, sviluppa dispositivi ad alta sicurezza per la conservazione di spermatozoi, ovociti, embrioni e tessuti, garantendo massima protezione dalla contaminazione crociata grazie a resine ionomeriche biocompatibili e prive di plastificanti. Con oltre 200 brevetti depositati e una presenza in più di 70 paesi tramite filiali e una rete di distributori, Cryo Bio System è oggi un punto di riferimento globale nella medicina della riproduzione, nel biobanking e nella ricerca biomedicaCellVision, azienda olandese giovane ed innovativa, produce sia vetrini monouso per l’analisi del liquido seminale (manuale o con sistemi CASA) che camere di conta monouso (con griglia tipo Makler, tipo Post-Vasectomia, tipo Neubauer Improved, tipo Bürker-Türk, tipo Thoma, tipo Bürker e tipo Fuchs Rosenthal).MotilityCount ApS è stata fondata nel 2011 da imprenditori e scienziati con una lunga esperienza nel campo delle Tecnologie di Riproduzione Assistita (ART).
1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. Il numero di coppie che ricevono una diagnosi di infertilità è in aumento. L’intero processo si svolge in un laboratorio di PMA, in condizioni controllate che favoriscono lo sviluppo embrionale fino allo stadio di blastocisti. Con un piano terapeutico specifico, si mira ad ottenere una crescita multipla dei follicoli e dunque la possibilità di recuperare più ovociti. Come da progetto terapeutico personalizzato, la donna al suo domicilio inizia la terapia elaborata appositamente per lei e programma un primo controllo di monitoraggio follicolare attorno all’8° giorno del ciclo. Nella data stabilita, attorno al 12°/13° giorno del ciclo, si procede alla puntura dei follicoli ovarici e all’aspirazione del liquido follicolare per la ricerca degli ovociti. Si tratta di una procedura che avviene in anestesia locale e blanda sedazione, quindi la donna non avverte nessun dolore e, dopo una degenza di un paio di ore, viene dimessa. Intanto il partner maschile fornisce il campione di liquido seminale che in laboratorio viene trattato per essere utilizzato nella fecondazione in vitro. Il fluido follicolare viene esaminato in laboratorio e gli ovociti presenti vengono preparati per la fertilizzazione mediante tecniche come FIVET o ICSI. Nella FIVET gli ovociti e gli spermatozoi vengono posti a contatto e si attende che la fecondazione avvenga spontaneamente, mentre nella ICSI è il biologo a selezionare un singolo spermatozoo da iniettare all’interno del singolo ovocita. Nei 3-5 giorni successivi alla fecondazione in vitro, il biologo segue lo sviluppo degli embrioni durante la coltura embrionale e si programma il transfer embrionale in utero. Come da normativa, vengono trasferiti in utero al massimo 3 embrioni, ma in genere si effettua il transfer di 1-2 embrioni e si procede alla crioconservazione degli eventuali embrioni soprannumerari. Il transfer embrionale in utero è lo step finale del percorso di fecondazione in vitro: è una procedura non fastidiosa e non dolorosa, che le donne vivono come una comunissima visita ginecologica. Due sono gli aspetti che il Prof. medicina informazionale: perché l’organismo femminile non rigetti l’embrione e anzi ne accetti l’impianto, è stata messa a punto una innovativa tecnica biofisica che permette la trasmissione del segnale bioenergetico maschile al corpo della donna.
1. La fecondazione in vitro è una tecnica di procreazione medicalmente assistita che consiste nell’unione tra ovocita e spermatozoo in laboratorio. 2. 3. 4. 5. Un ciclo completo di fecondazione in vitro dura generalmente circa 3 settimane, a partire dall’inizio della stimolazione e fino al transfer embrionale. La durata è comunque variabile in base al protocollo terapeutico specifico e anche in base alla risposta ovarica alla terapia. 6. 7. 8. 9. Sì. 10. 11. 12.
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